孢子分离法：取八成熟的良好种菇，去杂物，用75%酒精抹擦菇体，去除菇柄，放入灭菌的器皿内备用。用一个顶部有孔口的玻璃罩，罩下放一张干净的白纸，白纸上放一培养皿，皿口向上。取一铁丝、双层纱布、棉塞备用。以上物品放在一白瓷盆内，物品全部经灭菌处理。

把种菇用铁丝钩着菇盖，菌褶向着培养皿，挂在罩顶的孔，菇体在罩内稍接近培养皿为宜。用棉塞、纱布把罩孔封好。连白瓷盆一起在适温漫射光条件下培养1220小时。孢子散出，用接种针或接种环取单孢或少数几个孢子在斜面或平板培养基上划线分离，要求无菌操作。把接种的培养基在适温、黑暗条件下培养34天可得纯培养菌丝体。孢子分离法还有褶抹法、钩悬法、粘附法。